無菌處理
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始終用70%的乙醇擦拭手和工作區域。
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建議戴手套。這樣可以防止任何異物在測試過程中與客戶和樣品接觸。如果不使用手套,則必須在測試之前和之后洗手。
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將其放入細胞培養罩之前,請先用70%的乙醇擦拭容器,燒瓶,平板和培養皿的外部。
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避免直接從瓶或燒瓶中倒入培養基和試劑。
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使用無菌玻璃或一次性塑料移液器和移液器來處理液體,并且每個移液器只能使用一次,以免造成交叉污染。除非要使用無菌移液器,否則不要拆開它們的包裝。將移液器放在工作區。
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使用后務必蓋好瓶子和燒瓶,并用膠帶密封多孔板或將它們放在可轉售的袋子中,以防止微生物和空氣傳播的污染物進入。
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在準備使用時,切勿揭露無菌的燒瓶,瓶,培養皿等,也不要將其暴露在環境中。完成后立即歸還封面。
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如果要取下蓋子或蓋子,并且必須將其放在工作表面上,則將蓋子的開口朝下放置。
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僅使用無菌玻璃器皿和其他設備。
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執行無菌操作時,請注意不要說話,唱歌或吹口哨。
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盡快進行實驗以zui大程度地減少污染。
接種瓊脂平板,斜坡和培養物
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盡可能快地進行培養物的轉移,使試管和培養皿向空中開放的時間zui短。
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通常的做法是將瓊脂板打開,使其遠離身體,而不要從底座上完全取下蓋子。
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如果皮氏培養皿的蓋子可能需要比平常更長的時間移除,請在本生燈燃燒器火焰附近非常近的工作以減少污染的機會。
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如果您經常感染帶有真菌孢子的培養皿,請進一步減少吃水的機會,并考慮從瓊脂表面朝下的下方接種培養皿。這樣,孢子從空中沉降到板上的機會可能更少。
使用線環
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使用線環時,請像握住筆一樣,將線環的手柄靠近頂部,并保持幾乎垂直的角度。這使小指可以自由握住瓶子/試管的螺帽/棉塞。它還可以確保回路上的任何液體培養物都會掉入火焰中。
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在使用前后,通過在咆哮的藍色本生燈中加熱至熾熱,對電線環進行消毒。這確保了污染的細菌孢子被破壞。
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燃燒過程應逐漸加熱回路的**。這是因為使用后它將包含培養物,該培養物可能會在快速加熱時飛濺,并可能釋放出小的培養物顆粒,從而形成氣溶膠。
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將電線的手柄端放在火焰的淺藍色錐中。這是火焰中zui冷的區域。
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將其余的電線緩慢向上拉入火焰的zui熱區域-緊挨著藍錐。
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保持在那里直到變熱。
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確保電線的全長受到足夠的加熱。
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讓其在空氣中冷卻幾秒鐘,然后立即使用。
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請勿放下環圈或在周圍搖晃。
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使用后立即重新消毒回路。
使用移液器
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無菌刻度或滴定(Pasteur)移液管用于轉移培養物,無菌培養基和無菌溶液。
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從裝有棉絨塞的一端將移液器從其容器/包裝中取出,注意不要緊握移液器。
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適合奶嘴。有時將奶頭先浸入無菌液體中以潤滑它是有幫助的。
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像握筆一樣握住移液管桶,但不要抓住奶頭。這樣,您的小手指就可以隨意握住奶瓶/試管的蓋子/棉塞了,而您的拇指則可以自由地控制奶頭。
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小心地壓下奶嘴,并吸收一定量的液體,該液體足以達到所需的量,但不能到達并潤濕棉絮塞。
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用移液器**將吸頭擠到液體表面下方會擠入奶嘴,氣泡可能會導致“吐出”,進而形成氣溶膠。為避免這種情況,請在將吸頭放入液體之前先擠壓乳頭。
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然后輕輕釋放壓力,直到吸出所需量的液體,然后將移液器吸頭從液體中提出。
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輕輕退回多余的東西。
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使用后立即將被污染的移液器放到附近的消毒劑丟棄罐中。
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僅在移液器在廢棄鍋中后才移開奶嘴,否則培養液滴會污染工作表面。
燃燒瓶子和試管的脖子
這確保了沒有微生物進入容器的口中以污染培養物或培養基。使瓶口通過火焰會產生對流電流,使其遠離開口,并有助于防止污染?;鹧娴母邷夭糠治挥趦炔苛了{色“圓錐”上方,因此需要將容器移動通過火焰,而不是固定在適當的位置。
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松開瓶蓋,以便輕松取下。
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用左手提起瓶子/試管。
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用小手curl著右手的手掌,取下瓶/試管的蓋子/棉線塞。(轉動瓶子,而不是蓋子。)
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請勿放下蓋子/棉線塞。
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向前或向后通過熱的本生燈燃燒器,對瓶/試管的頸部進行火焰燃燒。
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完成所需的步驟(例如,撤回培養)后,用小手指將瓶蓋/棉塞塞到瓶子/試管上。照顧自己!瓶子會很熱。(轉動瓶子,而不是蓋子。)
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如果棉絮塞部分變形,則可以通過在推下塞塞時緩慢扭轉容器的嘴部,將其更容易地引導回容器的頸部。
消毒表面
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對于技術人員,建議使用乙醇消毒,因為其作用迅速(約5分鐘)。技術人員將更有經驗,并有能力應對使用乙醇引起的火災隱患。